永生化细胞系构建服务

美高梅·(MGM)中国生物科研技术团队已全面推出构建永生化细胞系技术服务，可以使原代细胞转化为正常的二倍体细胞，诱导细胞持续增殖，为基因编辑细胞系构建、WB等实验提供细胞素材。本公司开发了致癌基因表达和基因编辑的两种方法进行细胞永生化服务。

永生化细胞系简介

正常组织来源的细胞在体外培养条件下可发生增殖和分裂，然而，体外经过有限次（1-3代）的传代后，就会发生衰老和凋亡。但是，某些在体外培养的原代细胞经过自发的或受外界因素的影响从衰老机制中逃离，从而具有无限增殖能力并可以无限传代的细胞系称为永生化细胞系。原代细胞自发永生化的几率非常小，因此，通过基因转染等技术将外源基因转入原代细胞内，从而建立永生化细胞系。

目前，人们已建立了多种细胞永生化的方法，包括：SV40病毒感染人和啮齿动物细胞后，病毒DNA随机整合至宿主基因组，其早期区基因编码的SV40T抗原可导致细胞的永生化，是建立永生化细胞株的常用方法之一。原代细胞端粒酶激活也能是某些细胞永生化。在原代培养的细胞中将人端粒酶催化亚基(hTERT)基因整合到基因组中能稳定端粒的长度，使细胞易于永生化。然而，对于有些细胞，端粒酶激活后并不足以使细胞永生化，还需要借助SV40法。目前，已有许多啮齿动物细胞，如小鼠胚胎成纤维细胞和小鼠星形胶质细胞，已成功地被SV40T抗原永生化且被转染的成纤维细胞传代延长达20-30代。利用含端粒酶逆转录酶和SV40T抗原的重组逆转录病毒感染，对大鼠肠细胞进行转染，建立了永生化的细胞系。此外，也有研究者利用HPV16E6E7 转染人子宫颈上皮细胞，建立了永生化的细胞系。尽管目前有多种细胞永生化的方法，但不同的方法不一定会使原代细胞永生化。由于细胞的物种来源和组织部位不同，其细胞增殖和凋亡机制也不尽相同，因此，每种原代细胞永生化的分子机制也不尽不同，其永生化细胞的方法也不同。

永生化细胞系特点

1、 能够无限增殖；

2、 在一定传代数范围内，保持正常二倍体染色体核型；

3、 能筛选单克隆细胞；

4、 构建CRISPR/Cas9敲除细胞系。

永生化细胞系应用

服务说明：

提供活力较强的原代细胞或委托美高梅·(MGM)中国进行原代细胞培养

最终交付：

两瓶25cm²培养瓶的永生化细胞；

冻存的原代细胞3管；

永生化培养细胞图片和COA报告。

服务流程：

订单接收-签定合同-永生化细胞系构建-鉴定-发货。

如何订购：

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